色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經過拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20µm(5~10µm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
色譜柱的安裝:
?、拧⒂眠^濾和脫氣的流動相(不含緩沖鹽)*沖洗色譜儀的泵和管路,務必使系統(tǒng)中不含氣泡。
?、?、根據色譜柱上所標示的流動相流向,將色譜柱入口與泵端管路相連,柱出口不連。
?、恰⒈玫牧魉僭O為0.1mL/min或更低,流速緩慢地上升到正常流速(t>5min)。⑷、當溶劑從色譜柱出口端自由流出時,將流速設為0,把柱出口與檢測器端的管路相連。
?、?、用10-30倍柱體積的流動相、正常流速平衡色譜柱。
⑹、氨基柱、氰基柱既可在正相環(huán)境下使用,也可在反相環(huán)境下工作。當需要從反相變?yōu)檎嗷蛘嘧優(yōu)榉聪鄷r,需要用20-30倍柱體積的THF作為過渡溶劑沖洗系統(tǒng),否則易使泵的單向閥堵塞,出現壓力異常的現象。